PCR analīze: kas tas ir? Kā pareizi lietot PCR testu

Ne tik sen, uzticams,ļoti jutīga un ātra cilvēka dažādu infekcijas slimību diagnosticēšanas metode. Šo metodi sauc par "PCR analīzi". Kā mēs to pateiksim, kāda būs tā būtība, kādi mikroorganismi to var atklāt un kā pareizi to nodot tālāk?

Atklāšanas vēsture

Izgudroja polimerāzes ķēdes reakcijas metodi (PCR)Amerikāņu zinātnieks Cary Myullis in 1983. Sākotnēji uzņēmums patentētā diagnostikas metode "Valis Corporation", kurā viņš strādāja, un tās autors. Bet 1992. gadā visas tiesības un patenti tika pārdoti uzņēmumam "Hoffman-La Roche". Pēc tam izrādījās, ka līdzīgi pētījumi tika veikti paralēli, un tika ziņots, citas ASV biologu, piemēram, Alice Chen, David Edgar, John rre. 1980. gadā šī problēma tika risināta ar padomju zinātniekiem A. Slyusarenko, A. Kaledin un S. Gorodetsky. Tādēļ nebija iespējams noteikt vienīgo tiesību subjektu. Daudzi izcili bioķīmiķi ir veicinājuši polimerāzes ķēdes reakcijas metodes izstrādi un patentējuši to jauninājumus. Pašlaik PCR analīze tiek veikta visur speciāli aprīkotās laboratorijās.

PCR diagnostikas metodes būtība

PCR analīze: kas tas ir un kā tas darbojas? Metodes būtība ir palielināt specifisku mikrobu barotni, izmantojot mākslīgos apstākļos speciālu DNS polimerāzes fermentu. Lai to izdarītu, reiziniet esošo DNS materiālu. Tādējādi, paturot mikroorganismu klātbūtnē paraugā, tā daudzums palielinās, izmantojot bioķīmiskās laboratorijas manipulācijas, un baktēriju nevar noteikt mikroskopā.

PCR analīze - kas tas ir?

Kā notiek materiālo pētījumu veikšana?

Analīze prasa:

  • DNS matrica;
  • grunti, kas savieno materiāla fragmenta galus;
  • termiski stabils DNS polimerāzes ferments;
  • ķīmiskas vielas, kas nodrošina fermentu pienācīgu darbību;
  • buferšķīdums, kas nepieciešams, lai radītu piemērotus apstākļus DNS materiāla izaugsmei un attīstībai.

    PCR analīze 12

Lai veiktu PCR, tiek veikti 25-30 atkārtojumi, kas sastāv no trim posmiem: denaturēšana, atkaulošana un pagarinājums.

Polimerāzes ķēdes reakcijas analīzeiizmantojiet īpašu ierīci - pastiprinātāju. Modernās iekārtas ļauj iestatīt nepieciešamo programmu, lai apkures un dzesēšanas caurules, lai novērstu kļūdas diagnozes laikā.

Kur izmanto diagnozi?

Polimerāzes ķēdes reakcijas metodi izmanto dažādās medicīnas jomās:

  • Kriminālistikas zinātnieki to izmanto, lai identificētu ģenētisko materiālu, piemēram, mati, siekalās vai asinīs;
  • PCR asins analīze palīdz ar genotipēšanu, piemēram, lai noteiktu noteiktu ģenētiski inženierijas reakciju uz konkrētu zāļu;
  • izmantojot šādu metodi, nosaka ģimenes saiknes esamību starp cilvēkiem;
  • vispopulārākā PCR metode ir kļuvusi par medicīnas diagnostiku dažādu infekcijas slimību definēšanai.

Kādas infekcijas atklāj PCR?

Tātad, zāles ir sen un veiksmīgi izmantojušas PCR analīzi. Kas tas ir, mēs jau iemācījāmies. Ar kādiem patogēniem to var atklāt? Sekojošās infekcijas slimības tiek diagnosticētas ar PCR:

  • A, B, C hepatīts;
  • ureaplazmoze;
  • Candidiasis;
  • hlamīdija;
  • mikoplazmoze;
  • gardnerellez;
  • infekciozā mononukleoze;
  • trichomoniāze;
  • papilomas vīrusa infekcija;
  • tuberkuloze;
  • 1. un 2. tipa herpes infekcija;
  • Helicobacteriosis;
  • citomegalovīruss;
  • difterija;
  • salmoneloze;
  • HIV infekcija.

    PCR analīze HIV

Arī PCR metodes tiek izmantotas vēža diagnosticēšanai.

Priekšrocības

Diagnoze PCR ir vairākas priekšrocības:

  1. Augsta jutība. Pat ar tikai dažām mikroorganismu DNS molekulām PCR analīze nosaka infekcijas esamību. Metode palīdzēs hroniskas un latentas slimības. Bieži šādos gadījumos mikroorganisms tiek nekultivēts citos veidos.
  2. Pētījumam ir piemērots jebkurš materiāls, piemēram, siekalas, asinis, dzimumtieksme, mati, epitēlija šūnas. Visbiežāk sastopama asins analīze un urīnģenitāla izpēte PCR.

    PCR: veic testu

  3. Tas neprasa ilgtermiņa kultūru audzēšanu. Automātiskais diagnostikas process ļauj iegūt pētījuma rezultātus pēc 4-5 stundām.
  4. Metode ir gandrīz 100% uzticama. Tika reģistrēti tikai atsevišķi nepareiza negatīvā rezultāta gadījumi.
  5. Spēja identificēt vairākus veiduspatogēni no viena materiāla parauga. Tas ne tikai paātrina slimības diagnosticēšanas procesu, bet arī ievērojami samazina materiālu izmaksas. Bieži ārsts nosaka visaptverošu PCR analīzi. Eksāmena cena, kas sastāv no sešu patogēnu definīcijas, ir aptuveni 1500 rubļu.

Ieteikumi sagatavošanai analīzei

Lai rezultāti būtu ticami PĶR pētījumā, analīze jāveic pēc provizoriskās diagnostikas ieteikumiem:

  1. Pirms seilu atdalīšanas jums vajadzētu atturēties no pārtikas un zāļu lietošanas 4 stundas pirms materiāla ņemšanas. Tūlīt pirms procedūras noskalojiet muti ar vārītu ūdeni.
  2. Ņemot paraugu no vaiga iekšējās virsmas, jāievēro iepriekš minētie noteikumi. Pēc skalošanas ieteicams veikt vieglas ādas masāžas, lai izolētu dziedzera sekrēciju.
  3. Urīnu parasti ievāc mājās. Lai to izdarītu, jums ir jāveic rūpīgs dzimumorgānu tualetes. Ir nepieciešams savākt 50-60 ml urīna sterilā plastmasas traukā. Lai nodrošinātu materiāla tīrību, ieteicams sievietēm ievietot tamponu maksts, un vīrieši maksimāli velk ādas kroku. Jūs nevarat ņemt materiālu menstruāciju laikā.
  4. Lai iegūtu spermu, jums ir jāatturas no seksuāla raksturaAkts 3 dienas pirms vākšanas. Arī ārsti iesaka atteikties apmeklēt saunu un baudīt karstu vannu, alkohola un pikanta ēdiena dzeršanu. 3 stundas pirms testa, jums jāatturas urinēt.
  5. Urogenitālajai uztriepei, piemēram, jatiek veikta hlamīdiju PCR analīze, sievietēm un vīriešiem ieteicams izmantot seksuālo atpūtu 3 dienas. 2 nedēļas pirms testa antibakteriālās zāles nevajadzētu lietot. Nedēļas laikā jums jāpārtrauc lietot intīmo želeju, ziedes, maksts svecītes, šļirces. 3 stundas pirms testa, jums jāatturas urinēt. Menstruāciju laikā materiāla savākšana netiek veikta, tikai pēc 3 dienām pēc asins izvadīšanas pārtraukšanas var veikt urogenitālu uztriepi.

PCR grūtniecības laikā

Laikā, kad gaida mazuļa daudz infekcijasSeksuāli transmisīvās slimības ir ārkārtīgi bīstamas augļa normālai attīstībai. STS var izraisīt intrauterīnās augšanas palēnināšanos, spontāno abortu vai priekšlaicīgu dzemdību, iedzimtus bērna anomālijas. Tāpēc ir ārkārtīgi svarīgi iziet agrīnu PCR testu. Reģistrējoties jāiesniedz reģistrē - līdz 12 nedēļām.

Hlamīdiju PCR analīze

Žogu materiāls ir no dzemdes kakla kanālaar speciālas sukas palīdzību. Procedūra ir nesāpīga un nerada briesmas mazulim. Parasti grūtniecības laikā hlamīdiju analizē ar PCR metodi, kā arī ar ureaplazmozi, mikoplazmozi, citomegalovīrusu, herpes un papilomas vīrusu. Šādu eksāmenu kompleksu sauc par PCR-6.

PCR diagnozei HIV

Saistībā ar to, ka polimerāzes ķēdes reakcijas metodereakcija ir ļoti jutīga pret izmaiņām ķermenī un diagnozes apstākļiem, daudzi faktori var ietekmēt rezultātu. Tāpēc HIV infekcijas PCR analīze nav uzticama metode, tā efektivitāte ir 96-98%. Pārējos 2-4% gadījumu tests sniedz viltus pozitīvus rezultātus.

Bet dažās situācijās bez PĶR diagnostikas HIVneveikt. Parasti to lieto cilvēkiem ar viltus negatīvu ELISA rezultātu. Šādi indikatori norāda, ka cilvēkam vēl nav izveidojušās antivielas pret šo vīrusu, un tos nevar noteikt bez vairākkārtīga skaita palielinājuma. To var panākt, veicot asins analīzi, izmantojot PCR metodi.

Arī šī diagnoze ir nepieciešama bērniem pirmajā dzīves gadā, kuri ir dzimuši no HIV pozitīvas mātes. Šī metode ir vienīgais veids, kā droši noteikt bērna statusu.

PCR hepatīta diagnosticēšanai

Pielieto polimerāzes ķēdes reakcijas metodiatklāt A, B un C hepatīta vīrusa DNS jau ilgi pirms infekcijas antivielu veidošanās vai slimības simptomu parādīšanās. Īpaši efektīva ir C hepatīta PCR analīze, jo 85% gadījumu šāda slimība tiek veikta asimptomātiski un bez savlaicīgas ārstēšanas izdalās hroniskā stadijā.

PCR asins analīze

Savlaicīga patogēnas noteikšana palīdzēs izvairīties no komplikācijām un ilgstošas ​​ārstēšanas.

Visaptveroša PCR apsekošana

Kompleksā PCR analīze: kas tas ir? Šī testa metode polimezarnoy ķēdes reakcija, kas ietver noteiktu, vienlaicīgi vairāku sugu infekcija: Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, Candida, Trichomonas, citomegalovīrusu, Ureaplasma urealitikum, herpes 1. un 2. tips, gonoreja papilomas. Šādas diagnostikas cena svārstās no 2000 līdz 3500 rubļiem. atkarībā no klīnikas, materiālu un iekārtu, kā arī par analīzes veida: kvantitatīva vai kvalitatīva. Kas ir nepieciešams jūsu gadījumā - ārsts izlems. Dažos gadījumos, jūs vienkārši klātbūtnes patogēna citiem, piemēram, HIV, svarīgo lomu kvantitatīvo titrs. tekstā "PCR analīze 12" ar diagnozi visu iepriekš minēto patogēnie pārbaudi.

Analizēšanas rezultātu dekodēšana

PCR analīzes dekodēšana nav grūti. Indikatoram ir tikai divi skalas - "pozitīvs rezultāts" un "negatīvs rezultāts". Ja tiek konstatēts patogēns, ārsti var apstiprināt slimības klātbūtni ar 99% ticamību un turpināt ārstēšanu ar pacientu. Kvantitatīvajā infekcijas noteikšanas metodē atbilstošajā ailē tiks norādīta noteikto baktēriju skaitliskā vērtība. Tikai ārsts var noteikt slimības pakāpi un noteikt nepieciešamo ārstēšanu.

Kur pārnest PCR analīzi?

Dažos gadījumos, piemēram, nosakotHIV infekcija ar PCR metodi, ar negatīvu rezultātu, kļūst nepieciešams veikt papildu pārbaudes, lai apstiprinātu rezultātus.

Kur veikt analīzi?

Kur iesniegt PCR analīzi: valsts poliklīnikā vai privātā laboratorijā? Diemžēl pašvaldības medicīnas iestādēs, iekārtas un metodes bieži ir novecojušas. Tāpēc labāk privātās laboratorijās ir priekšroka ar modernām iekārtām un augsti kvalificētu personālu. Turklāt privātajā klīnikā rezultāti būs daudz ātrāki.

Maskavā piedāvā daudzas privātas laboratorijasveicot dažādu infekciju PCR analīzi. Piemēram, tādās klīnikās kā Vita, kompleksā klīnika, laimīgā ģimene un Uro-Pro tiek veikta PCR analīze. Eksāmena cena ir no 200 rubļu. viena patogēna definīcijai.

Var secināt, ka infekcijas diagnozePCR vairumā gadījumu ir ātrs un uzticams veids, kā infekcijas agrīnā stadijā organismā identificēt patogēnu. Bet dažos gadījumos ir vērts izvēlēties citas diagnozes metodes. Nepieciešamību veikt šādu pētījumu var noteikt tikai speciālists. Lai kodētu PCR analīzi, nepieciešama arī profesionāla pieeja. Ievērojiet ārsta ieteikumus un nedodiet sev testus, kas nav nepieciešami.

Patīk:
0
Neciporenko urīna analīze. Kā to salabot
Vispārēja urīna analīze. Kā lietot un kāda ir norma?
Kā tiek pārbaudīta fecal slēpta asinis?
Kur veikt analīžu atzīmi? Ko darīt, kad
Kā pareizi izdalīt fekāliju analīzi un to, vai tas ir nepieciešams
Kā pareizi ziedot asinis hormoniem?
Var veikt asins analīzi HIV
Kā pareizi iesniegt urīna analīzi?
Kāda būs urīna analīze (dekodēšana)
Populārākās ziņas
uz augšu